噬菌体随机肽库筛选HPV45亚型L1蛋白抗原表位

作者：彭亚允; 栗宁; 陈玉梅; 周景明; 刘红亮; 祁艳华; 梁超; 丁培阳; 朱习芳; 王爱萍^*

来源：郑州大学学报(理学版）, 2022, 54(01): 88-94.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6841.2021208

• 人乳头瘤病毒
• L1蛋白
• 单克隆抗体
• 噬菌体展示技术
• 表位

高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)可诱发女性宫颈癌，HPV45是HPV主要高危亚型之一，L1蛋白是主要的保护性蛋白。以大肠杆菌表达、纯化获得的重组蛋白SUMO-45 L1作为免疫原，通过杂交瘤技术制备抗HPV45 L1蛋白的单克隆抗体，并以单克隆抗体3C11为靶分子，使用噬菌体展示技术对随机十二肽库进行亲和淘选，三轮筛选后挑选12个与单抗3C11反应较强的克隆进行测序并分析。结果表明，噬菌体所展示的氨基酸序列与HPV45 L1蛋白序列“381VPNTYD386”相同，将其进行肽的合成，并通过斑点-酶联免疫吸附测定(dot enzyme-linked immunosorbent assay, Dot-ELISA)和间接竞争ELISA鉴定，最终鉴定出单克隆抗体3C11识别的L1蛋白线性表位“381VPNTYD386”。该表位的鉴定，为进一步分析HPV45 L1蛋白的结构和功能关系奠定了基础。

• 单位
  郑州大学; 生命科学学院