猪圆环病毒2型及猪细小病毒2型双重PCR检测方法的建立与应用

作者：张鑫杰; 薛少华; 吕紫欣; 黄喜荣; 陈羽璇; 蒙宁; 许雨杭; 杨小燕; 戴爱玲^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(11): 1379-1384.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0182

• 猪圆环病毒2型
• 猪细小病毒2型
• 双重PCR

猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒2型(PPV2)均为猪呼吸道疾病综合征(PRDC)的潜在致病病原。为了建立一种高效、快速、准确且能够同时鉴定PCV2和PPV2的双重PCR方法，下载GenBank已公布的多个PCV2及PPV2全基因序列并比对，针对PCV2和PPV2基因组的保守序列设计合成2对PCR引物，对双重PCR反应条件进行优化，建立了同时检测PCV2和PPV2的双重PCR方法，并对其敏感性，特异性及与普通单一PCR的符合率做出评价。结果显示，该方法能同时扩增出666 bp(PCV2)与254 bp(PPV2)的特异性片段，对阳性标准质粒pMD-PCV2和pMD-PPV2的检测限分别为1.0×102copies/μL和1.0×101copies/μL，对猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪乙型脑炎病毒、猪细小病毒1/4/6/7型和猪圆环病毒3/4型的核酸扩增结果均为阴性。对临床疑似患PRDC的86份肺部组织样品进行检测，结果显示，PCV2阳性率为30.2%,PPV2阳性率为59.3%，两者的共感染率为20.9%，与单一PCR检测结果一致。结果表明，本研究建立的双重PCR方法可有效、特异、灵敏、快速鉴定PCV2和PPV2，为PCV2和PPV2的快速检测及其流行病学调查提供有效的技术手段。

• 单位
  生命科学学院; 龙岩学院