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摘要
目的建立稀有型血细胞永生化细胞株,探讨血细胞多态性细胞工程实验室建立的方法。方法采用EB病毒转化技术,把携带稀有血型抗原的红细胞、已知抗原特异性的粒细胞,罕见特异性抗原的血小板及CD36缺失型的血小板的外周血淋巴细胞转化成永生化淋巴母细胞株,采用培养法和PCR法对细胞株进行支原体检测,染色体核型分析细胞株的稳定性。结果共建立稀有型血细胞LCLs 211株,其中稀有红细胞血型抗原LCLs 64株、已知抗原特异性的粒细胞抗原LCLs 8株、罕见特异性抗原的血小板LCLs 15株及CD36缺失型血小板LCLs 124株,总转化成功率为91%;所有的细胞株传代、冻存和复苏均成活,无基因突变、无支原体污染。经20代传代后未发现染色体突变。结论传代培养、细胞冻存、复苏和支原体污染防范等一整套技术过程基本满足建库要求,为血细胞多态性细胞工程实验室的建立提供科学依据。
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