AMPK/mTOR通路对慢性支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响及机制

作者：徐灵彬; 韩新鹏; 吴昌归^*

来源：国际呼吸杂志, 2021, 41(22).

• 哮喘
• 模型, 动物
• 气道平滑肌
• 增殖
• AMPK/mTOR通路
• shRNA干扰

目的观察二甲双胍对慢性支气管哮喘(哮喘)动物模型的气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的影响及机制。方法使用OVA致敏法制备慢性哮喘模型, 末次激发48 h后处死大鼠, 使用酶消化法进行ASMCs的原代分离培养。对原代培养的ASMCs的一磷酸腺苷活化的蛋白激酶α1(AMPK-α1)、S期激酶相关蛋白(SKP-2)的表达使用shRNA进行干扰, 之后采用Western blot检测AMPK/mTOR通路相关蛋白的表达。结果在原代培养的ASMCs中, 二甲双胍可激活AMPK通路, 能明显抑制ASMCs的增殖;雷帕霉素亦可明显抑制细胞的增殖, 两者均存在明显的量效关系(P值均<0.05)。沉默AMPK基因表达后, 可使ASMCs增殖增加(P<0.01), 进一步分析发现mTOR及下游的p70s6k磷酸化增加(P<0.05), 从而上调SKP-2基因表达(P<0.05)、下调P21基因表达(P<0.01);沉默SKP-2基因表达, 再干扰AMPK基因的表达, 可逆转其促进细胞增殖的作用(P<0.01)。结论 AMPK/mTOR通路对ASMCs增殖的调节是通过调节SKP2表达, 进而影响P21水平实现的。二甲双胍作为AMPK的激动剂, 有潜在的抑制哮喘患者气道平滑肌增生、进而改善气道重塑的作用。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学