外源性重组激活基因在人类细胞中的表达研究

作者：曾艳; 孙洪海; 王敏; 刘旭; 严丹丹; 孙龙飞; 刘志超; 韦星呈^*

来源：中国免疫学杂志, 2022, 38(16): 2001-2006.

• 重组激活基因-1(RAG-1)
• 重组激活基因-2(RAG-2)
• 真核表达载体
• 基因表达

目的：通过恢复RAG-1、RAG-2分子的表达挽救功能性淋巴细胞的分化、发育，探讨从基因水平上根治RAG-免疫缺陷病的技术方法，为进一步进行基因治疗打下基础。方法：(1)采用RT-PCR方法克隆人类RAG-1、RAG-2编码基因，同时构建RAG-1、RAG-2真核表达载体；(2)采用转染方法得到转染细胞体，使目的基因在人类细胞得到表达。结果：阳性克隆的测序结果与人类RAG-1、RAG-2基因完全相同，并且分别在获得重组细胞中检测到782 bp的人类RAG-1 mRNA转录产物和378 bp的人类RAG-2 mRNA转录产物，而pcDNA3.1空白对照未检测到任何hRAG-1 mRNA。结论：成功克隆了人类RAG-1、RAG-2基因，并在转染的人类细胞中获得了外源RAG-1、RAG-2的mRNA表达。

• 单位
  沈阳医学院