鸡贫血病毒vp1和vp2基因在毕赤酵母中的表达及产物免疫学特性的初步研究

作者：林欢; 高宏雷; 王晓艳; 高玉龙; 宋修庆; 李术强; 王笑梅

来源：中国预防兽医学报, 2008, (07): 495-499.

• 鸡贫血病毒
• vp1基因
• vp2基因
• 真核表达
• 毕赤酵母 CAV
• vp1 gene
• vp2 gene
• eukaryotic expression
• Pichia pastoris

利用特异性引物从pBluemCAV中PCR扩增得到鸡贫血病病毒(CAV)vp1、vp2基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切处理,纯化后,克隆至EcoRⅠ和NotⅠ双酶切处理的表达载体pPIC9K中,构建了真核表达质粒pPIC9K-VP1和pPIC9K-VP2。将pPIC9K-VP1和pPIC9K-VP2转化至毕赤酵母SMD1168中,在0.5%甲醇诱导下表达CAV-VP1、CAV-VP2蛋白,运用Westernblot和Dot-ELISA鉴定表达蛋白。结果表明,重组酵母菌株表达出约54ku和24ku的目的蛋白,与针对鸡贫血病毒的单克隆抗体发生特异性反应。将表达产物乳化后免疫6周龄BALB/c小鼠...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 哈尔滨工业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 中国科学院生物物理研究所