miR-483/CREB1轴介导桃叶珊瑚苷抑制髓核细胞胞外基质降解的研究

作者：杨少锋; 朱立国^*; 李兆勇; 李硕夫; 郭彦涛; 聂颖; 张晨阳

来源：湖南中医药大学学报, 2020, 40(05): 550-554.

DOI：10.3969/j.issn.1674-070X.2020.05.008

• 桃叶珊瑚苷
• 髓核细胞
• 胞外基质
• cAMP反应元件结合蛋白
• 微小RNA

目的研究miR-483/CREB1轴在桃叶珊瑚苷(aucubin, AU)抑制人退行性髓核(nucleus pulposus, NP)细胞胞外基质(extracellular matrix, ECM)降解中的功能作用。方法 AU处理人退行性NP细胞后,检测细胞活性、ECM相关蛋白及cAMP反应元件结合蛋白1(c AMP responsive element binding protein 1, CREB1)的表达。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)和Western blot检测miR-483表达变化对CREB1丰度的影响;双荧光素酶报告实验(luciferase, LUC)检测miR-483和CREB1-3’-UTR的靶向结合;CREB1过表达载体和(或)miR-483 mimics共转染后,AU处理,检测CREB1及ECM相关蛋白的表达。结果 AU可显著增强NP细胞活性(P=0.000 4),抑制ECM降解酶基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3, MMP-3)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5(a disintegrin and metalloproteinase domain with thrombospondin motif-5, ADAMTS-5)与CREB1的表达,促进胶原蛋白Ⅱ型胶原α1(collagen type II alpha 1 chain, COL2A1)和miR-483的表达(P<0.001)。miR-483过表达可抑制CREB1的表达(P<0.000 1),LUC实验表明miR-483可与CREB1-3’-UTR靶向结合。功能实验结果表明CREB1可削弱AU对NP细胞ECM的降解的抑制作用,而miR-483可部分逆转CREB1对AU的抑制作用。结论 AU诱导NP细胞表达miR-483,进而抑制CREB1的表达,增强NP细胞的活性,抑制ECM的降解。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院; 中国中医科学院望京医院