LSEC、Raw264.7、Hepa1-6三种鼠源细胞系cGAS-STING信号通路的本底表达及激活研究

作者：周钰婷; 张勇; 杨建; 李飞^*

来源：新疆医科大学学报, 2022, 45(05): 486-491.

• cGAS-STING信号通路
• STING激活剂
• 肝细胞系

目的 研究小鼠肝窦内皮细胞（LSEC）、小鼠巨噬细胞（Raw264.7）和小鼠肝癌细胞（Hepa1-6）cGAS-STING信号通路的本底表达及激活感染情况。方法 将LSEC、Raw264.7和Hepa1-6三种细胞培养过夜，使用激活剂poly(dA:dT)、2, 5-己酮可可碱（DMXAA）刺激，人肝癌细胞（HepG2.2.15）上清液浓缩纯化后的乙型肝炎病毒（HBV）感染，12 h后收集细胞提取RNA和蛋白，采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)和蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测LSEC、Raw264.7、Hepa1-6细胞cGAS-STING信号通路关键基因cGAS、STING、IFN-β的mRNA水平和cGAS、STING、IRF3及磷酸化IRF3蛋白水平。结果 LSEC的本底表达量最高。Poly(dA:dT)可显著提高3种细胞IFN-βmRNA的表达（P<0.01）;DMXAA可显著提高三种细胞cGAS、STING mRNA的表达（P<0.05），促进了STING和IRF3蛋白的磷酸化。HBV可显著抑制Raw264.7、Hepa1-6细胞IFN-β mRNA的表达（P<0.01），显著激活LSEC细胞的cGAS、IFN-β mRNA的表达（P<0.01）并促进STING和IRF3蛋白的磷酸化。结论 三种细胞cGAS-STING信号通路的本底表达、激活、感染存在明显差异。

• 单位
  分子医学重点实验室; 桂林医学院附属医院; 新疆医科大学