Ki-67基因siRNA表达质粒的构建、鉴定及功能研究

作者：郑骏年; 马腾骧; 孙晓青; 陈家存; 温儒民; 曹敬毅; 杨文发; 李望; 刘俊杰

来源：中华实验外科杂志, 2005, (05): 611-613.

• 基因表达
• RNA干扰
• 质粒 Gene expression
• RNA interfering
• Plasmid

目的构建肿瘤增殖基因Ki-67小干扰RNA(siRNA)表达质粒,研究其对人肾癌细胞Ki-67基因表达的阻抑作用,探索肾癌基因治疗新的途径。方法设计有小发夹机构的2条Ki-67siRNA对应模板DNA序列,煺火处理后克隆至pSliencer3.1质粒,构建重组质粒pSliencer-Ki-67。将pSliencer-Ki-67转染人肾癌786-0细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westernblot检测Ki-67表达。结果酶切及测序证实质粒pSliencer-Ki-67构建成功。其可显著抑制786-0细胞Ki-67mRNA、Ki-67蛋白表达。结论成功构建的Ki-67siRNA...

• 单位
  徐州医学院附属医院; 天津市泌尿外科研究所