NLRP3炎症小体介导的巨噬细胞极化在ITP中的作用

作者：宋传龙; 海力其古丽·努日丁; 焦红杰; 王学梅; 严媚^*

来源：安徽医科大学学报, 2023, 58(01): 132-139.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.01.022

• 免疫性血小板减少症
• NLRP3炎症小体
• M1型巨噬细胞

目的 探讨在免疫性血小板减少症(ITP)中NLRP3炎症小体的活化水平及抑制NLRP3介导的炎症小体活化对M1型巨噬细胞极化与免疫功能的影响。方法 RT-qPCR法检测ITP患者(ITP组)和健康对照组(Control组)外周血单个核细胞(PBMC)与CD14+单核细胞中NLRP3 mRNA的表达；ELISA法检测两组血清中IL-1β与IL-18的含量；Pearson相关系数分析NLRP3、IL-1β与IL-18表达水平与血小板计数的相关性；将ITP患者来源的M0型巨噬细胞(MDMs)分为4组：IgG对照组(IgG组),MCC950处理组(MCC950组),LPS、IFN-γ与IgG处理组(LPS+IFN-γ+IgG组)和LPS、IFN-γ与MCC950处理组(LPS+IFN-γ+MCC950组);RT-qPCR与Western blot检测4组MDMs中M1型巨噬细胞标志物CD86、iNOS、MCP-1 mRNA与蛋白水平；Western blot检测各组MDMs中NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、ASC、cleaved caspase-1与IL-β的表达；流式细胞术检测各组MDMs对血小板的吞噬能力，CFSE法检测各组MDMs对CD4+T与CD8+T的增殖影响。结果 与Control组相比，ITP组NLRP3 mRNA水平和IL-1β与IL-18含量均升高(P<0.05);ITP患者中血小板计数与NLRP3、IL-1β和IL-18呈负相关关系(P<0.05)。与IgG组相比，LPS+IFN-γ+IgG组与LPS+IFN-γ+MCC950组细胞中CD86、iNOS、MCP-1的mRNA与蛋白表达水平增加(P<0.05), NLRP3、 ASC、cleaved caspase-1、 IL-β蛋白表达与血小板吞噬能力和对CD4+T与CD8+T细胞的增殖促进能力升高(P<0.05)，而与LPS+IFN-γ+IgG组相比，LPS+IFN-γ+MCC950组细胞中上述检测指标均降低(P<0.05)。结论 在ITP中NLRP3炎症小体活化水平升高，且与MDMs的过度M1型极化相关，而抑制NLRP3介导的炎症小体活化可改善巨噬细胞的M1型极化与免疫功能。

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院