摘要

目的 观察蜕皮甾酮对皮肤光老化和黑色素生成的影响。方法 (1)实验分为正常对照组、1.0μmol/L蜕皮甾酮组、1.5μmol/L蜕皮甾酮组、2.0μmol/L蜕皮甾酮组,各组分别处理角质形成细胞(HaCaT细胞)、黑素细胞(B16F10细胞)和人真皮成纤维细胞(HDF细胞)后,MTT法检测细胞活力。(2)实验分为正常对照组、UVB组、1.0μmol/L蜕皮甾酮组、1.5μmol/L蜕皮甾酮组、2.0μmol/L蜕皮甾酮组,Annexin V-FITC/PI双标法检测HaCaT细胞凋亡情况,Hoechst33258染色法检测凋亡细胞的形态,Western blot法检测HaCaT细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、环氧化酶-2(COX-2)、沉默调节蛋白1(Sirt-1)表达情况。(3)实验分为正常对照组、1.0μmol/L蜕皮甾酮组、1.5μmol/L蜕皮甾酮组、2.0μmol/L蜕皮甾酮组,Western blot法检测HaCaT细胞中透明质酸合成酶2(HAS-2)、转谷氨酰胺酶1(TGM1)和HDF细胞中Ⅰ型胶原蛋白Iα1肽链(COL1A1)表达情况。(4)实验分为正常对照组、黑色细胞刺激素组、1.0μmol/L蜕皮甾酮组、1.5μmol/L蜕皮甾酮组、2.0μmol/L蜕皮甾酮组、熊果苷组,采用分光光度仪检测B16F10细胞黑色素生成及分泌情况。(5)实验分为正常对照组、左旋多巴组、1.0μmol/L蜕皮甾酮组、1.5μmol/L蜕皮甾酮组、2.0μmol/L蜕皮甾酮组,采用分光光度仪检测各组蘑菇酪氨酸酶活性。结果 不同浓度的蜕皮甾酮对HaCaT细胞、B16F10细胞、HDF细胞活力均无明显影响。蜕皮甾酮各组HaCaT细胞凋亡率及HaCaT细胞中MMP-1、MMP-9、COX-2蛋白相对表达量均明显低于UVB组(P均<0.05),HaCaT细胞中Sirt-1蛋白相对表达量均明显高于UVB组(P均<0.05)。蜕皮甾酮各组HaCaT细胞中HAS-2、TGM1蛋白相对表达量和HDF细胞中COL1A1蛋白相对表达量均明显高于正常对照组(P均<0.05)。蜕皮甾酮各组和熊果苷组B16F10细胞黑色素生成和分泌吸光度值均明显低于黑色细胞刺激素组(P均<0.05)。蜕皮甾酮各组蘑菇酪氨酸酶活性均明显低于左旋多巴组(P均<0.05)。结论 蜕皮甾酮可能具有延缓皮肤光衰老、抗皱和抗黑色素生成作用。