人源胸腺素α原和白介素2融合蛋白的基因克隆与原核表达

作者：黄明; 韦剑; 周飞燕

来源：广东药学院学报, 2008, (03): 287-290.

DOI：10.16809/j.cnki.1006-8783.2008.03.029

• 胸腺素α原
• 白介素2
• 融合蛋白
• 表达 prothymosin α
• interleukin 2
• fusion protein
• expression

目的克隆人胸腺素α原/白介素2融合基因,构建其原核表达载体并在大肠杆菌系统中有效表达。方法采用RT-PCR方法,从人白血病细胞和人T淋巴细胞中分别扩增得到胸腺素α原/白介素2基因,利用基因重组技术将融合基因片段重组于pET42a原核表达载体上,构建成pET42a-PI。经酶切、测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌Rosseta,IPTG诱导蛋白表达。表达产物经离子交换和分子筛纯化后进行Western blot分析,通过人外周血单核细胞玫瑰花结实验对融合蛋白进行了初步的活性测定。结果凝胶电泳显示PCR产物的长度约750 bp,测序结果表明,扩增片段与预期序列一致。重组菌在IPTG诱导下表达相对分子...

• 单位
  广州拜迪生物医药有限公司