微小RNA通过SIRT1调控小鼠耳蜗老化HEI-OC1细胞凋亡的研究

作者：袁佳添; 谢奇伟; 王玥; 程鹏; 王耀文^*

来源：中国耳鼻咽喉头颈外科, 2023, 30(02): 84-88.

DOI：10.16066/j.1672-7002.2023.02.004

• 老年性聋
• 细胞凋亡
• miR-96
• SIRT1
• HEI-OC1

目的 构建小鼠耳蜗毛细胞株HEI-OC1(house ear institute-organ of Corti 1)老化模型，探索微小RNA-96(miR-96)可否通过SIRT1调控老化HEI-OC1凋亡。方法 CCK-8筛选D-半乳糖浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡，Western blot检测p53、p38、caspase-3蛋白表达。q RT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达，Western blot检测SIRT1蛋白表达。miR-96模拟物转染HEI-OC1细胞，qRT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达，Western blot检测SIRT1、caspase-3蛋白表达。结果 HEI-OC1细胞在15 mg/ml D-半乳糖条件下培养72 h后，凋亡较对照组显著增加（P<0.01），且p53、p38(P<0.05)及caspase-3(P<0.0001)蛋白表达明显增加。老化组miR-96与SIRT1 mRNA和蛋白表达均明显减低（P<0.05）。miR-96过表达后，SIRT1 mRNA及蛋白较对照组表达升高，caspase-3蛋白表达降低（P<0.05）。结论 老化HEI-OC1细胞中miR-96、SIRT1 mRNA与蛋白的表达均下降。miR-96可通过上调SIRT1抑制HEI-OC1细胞的凋亡。miR-96、SIRT1可能成为保护老年性聋耳蜗毛细胞的作用靶点。

• 单位
  宁波市第一医院; 宁波市北仑区人民医院; 宁波大学