摘要
目的探讨上皮-间叶转化(EMT)在大肠癌耐药中的作用及分子机制。方法采用药物浓度递增的方法建立大肠癌LOVO细胞奥沙利铂(L-OHP)耐药细胞株LOVO/L-OHP,免疫荧光和蛋白质印迹法(Western blot)检测LOVO和LOVO/LOHP细胞E-cadherin和Vimentin表达;Western blot检测核转录因子Snail、Twist表达;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖。结果与LOVO细胞比较,LOVO/L-OHP皮表型消失,细胞膜E-cadherin表达减弱(22.63±3.25)%(P<0.01),获得间叶细胞表型,表达Vimentin(475.42±58.36)%(P<0.01)。LOVO/L-OHP细胞株Twist表达轻度增加(116.42±18.36)%(P>0.05),Snail表达显著增加(382.18±41.33)%(P<0.01)。siSnail上调E-cadherin表达(246.82±31.57)%(P<0.01),下调Vimentin表达(28.75±3.96)%(P<0.01);siSnail显著增强LOVO/L-OHP细胞株L-OHP化疗敏感性,对照组和siSnail组的IC50分别为23.75μg/mL和12.42μg/mL。结论 EMT在大肠癌细胞L-OHP耐药中可能起重要作用,抑制EMT可恢复耐药细胞化疗敏感性。
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单位重庆市江津区中心医院