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摘要
目的 研究赖氨酸甲基转移酶(SETD8)对乳腺癌MCF-7细胞转移的调控作用。方法 用q RT-PCR和免疫组化实验检测癌旁正常组织和乳腺癌组织中SETD8表达。使用Lipofectamine3000分别将小干扰RNA阴性对照(Control),SETD8的小干扰RNA(si RNA-1、si RNA-2组)转染到MCF-7细胞中,Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力。q RT-PCR检测SETD8、Slug、Zeb1、Zeb2、Twist1、Snail的m RNA表达量。Westernblot检测SETD8和Slug的蛋白表达水平。染色质免疫共沉淀(Ch IP)实验检测H4K20me1修饰在Slug基因启动子上的富集情况。结果 与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织中SETD8的m RNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05)。与Control组比较,敲低组SETD8的m RNA和蛋白水平均显著降低(P<0.0001)。相比于Control组,细胞迁移、侵袭能力减弱,Slug蛋白表达水平降低。与Ig G组比较,H4K20me1修饰能够显著富集在Slug基因启动子上游1500～2000bp之间(P<0.001)。结论下调SETD8的表达能够抑制MCF-7细胞的转移能力,其机制可能与SETD8调控Slug基因转录相关。
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