高雄激素诱导人卵巢颗粒细胞凋亡和程序性细胞凋亡因子4表达上调

作者：仇雪梅; 丁晨; 魏友华^*; 赵淑芹

来源：中华生殖与避孕杂志, 2019, (10).

• 雄激素
• 卵巢颗粒细胞
• 凋亡
• PDCD4
• 多囊卵巢综合征

目的 探讨高雄激素和程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)在人颗粒细胞凋亡中的作用。方法 在人卵巢颗粒细胞系KGN中转染PDCD4表达载体,荧光定量PCR的方法检测过表达前后PDCD4的表达情况,应用流式细胞仪技术和Annexin V染色检测PDCD4过表达对KGN细胞凋亡的影响；应用不同浓度梯度的睾酮(0、10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5 mol/L)处理KGN细胞,分别于24 h和48 h后应用实时定量PCR和Western blotting的方法检测不同浓度睾酮处理后颗粒细胞中PDCD4的表达水平,通过流式细胞仪技术检测48 h后不同浓度梯度的睾酮对颗粒细胞凋亡的影响。应用PDCD4小干扰RNA在高浓度睾酮(10-5 mol/L)处理的KGN细胞中敲低PDCD4的表达,应用流式细胞仪技术检测PDCD4的表达敲低对高雄激素诱导的细胞凋亡的影响。结果 PDCD4在人卵巢颗粒细胞系KGN细胞中过表达后,Annexin V-PE染色和流式细胞仪检测结果显示KGN细胞凋亡数显著增加(P=0.014)。不同睾酮浓度处理KGN细胞,与NC组比,10-5 mol/L组和10-6 mol/L组PDCD4基因表达水平均上调(24 h：P=0.035,P=0.038；48 h：P=0.029,P=0.009)；PDCD4蛋白水平表达升高。高浓度的睾酮(10-6 mol/L和10-5 mol/L)处理KGN细胞48 h后,颗粒细胞凋亡显著增加(10-6 mol/L组与NC组比较P=0.036；10-5 mol/L组与NC组比较P=0.028),差异具有统计学意义。在10-5 mol/L浓度睾酮处理的KGN细胞中敲低PDCD4的表达后,与未敲低组比,细胞凋亡率显著降低(P=0.038)。结论 PDCD4能促进人卵巢颗粒细胞凋亡,高浓度睾酮能诱导颗粒细胞凋亡和上调颗粒细胞中PDCD4的表达水平,其诱导颗粒细胞凋亡的机制可能与PDCD4介导的凋亡通路有关。

• 单位
  无锡市妇幼保健院; 枣庄市妇幼保健院