摘要
目的 探讨番石榴叶(PGL)水提物对四氧嘧啶(ALX)诱导的体外INS-1细胞凋亡的保护作用及其可能的机制。方法 以大鼠胰岛细胞瘤细胞株INS-1建立体外模型,利用CCK-8法测定药物对INS-1细胞活力的影响;采用化学自发光法测定各组细胞的细胞内ATP含量;采用Hoechst33342法测定凋亡形态学;采用Annexin V-FITC法测定细胞凋亡;采用DCFH-DA法测定细胞内活性氧含量;采用Rhodamin 123法检测细胞线粒体膜电位;采用Western blot法测定Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase 3、GRP78、CHOP、Nrf2、HO-1蛋白的表达量。结果 PGL水提物各剂量组的细胞活力、细胞内ATP含量、线粒体膜电位及Bcl-2、Nrf2及HO-1等凋亡及抗氧化应激相关蛋白的表达量和Nrf2的核转位程度均高于ALX20组,差异有统计学意义(P<0.05);PGL水提物各剂量组的细胞核浓染、核固缩及凋亡细胞的比例、细胞内活性氧含量以及Bax、Cleaved-Caspase 3、GRP78及CHOP等凋亡及内质网应激相关蛋白的表达均低于ALX组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PGL水提物能有效逆转ALX诱导的体外INS-1细胞凋亡,其机制与PGL水提物增强细胞抗氧化应激、减轻内质网应激有关。
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单位基础医学院; 肇庆医学高等专科学校; 肇庆市中医院