摘要
目的肝纤维化的主要病理变化是细胞外基质的沉积与降解障碍,本研究旨在观察大鼠肝星状细胞过表达基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)后肝纤维化相关指标的变化。方法构建含MMP-13全长编码基因的表达质粒,并转染大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),荧光定量PCR与Western blotting方法分别检测MMP-13、CollagenI基因与蛋白水平的表达。结果成功构建含MMP-13全长编码基因的表达质粒dl6-95-MMP-13;dl6-95-MMP-13转染大鼠HSC细胞7d后,荧光定量PCR结果显示,MMP-13基因转录水平明显增加,而CollagenI在基因转录水平有轻度增加;Western blotting结果显示转染7d后,酶原及活化形式的MMP-13表达明显增加,尤其是活化形式的MMP-13;转染后的大鼠HSC中CollagenI蛋白表达明显下降。结论大鼠HSC高表达MMP-13后显著抑制CollagenI蛋白的表达,其机制主要通过发挥其酶活性降解CollagenI蛋白,而对CollagenI在基因水平的表达无显著影响。
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单位首都医科大学附属北京友谊医院