CD147 siRNA表达载体的构建与鉴定

作者：陈翔; 颜克香; 谢红付; 李吉

来源：中华皮肤科杂志, 2005, (06): 368-370.

DOI：10.3760/j.issn:0412-4030.2005.06.014

• CD147
• siRNA
• 遗传载体

目的构建CD147siRNA表达载体,分析CD147在皮肤肿瘤浸润和转移中的作用机制。方法根据基因库上的CD147cDNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链。寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSUPER质粒中,并对重组质粒(命名为pSUPER/CD147siRNA)进行酶切、PCR及测序鉴定。结果PCR扩增片段与预期结果相符,双酶切证实CD147siRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致。结论成功构建CD147siRNA表达载体,CD147可为治疗肿瘤开辟新途径。

• 单位
  中南大学湘雅医院