芍药苷对醋酸铅诱导海马神经元凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

作者：严伟伟; 李国辉; 贾仰民; 娄懿; 干晓瑜

来源：中国现代应用药学, 2022, 39(06): 730-737.

DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2022.06.003

• 芍药苷
• 醋酸铅
• 海马神经元凋亡细胞
• Bcl-2/Bax蛋白

目的 探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)对醋酸铅诱导海马神经元凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法 分离培养胎鼠海马神经元细胞，细胞免疫荧光染色鉴定纯度。MTT测定海马神经元细胞活力以确定醋酸铅最适造模浓度及时间，同时筛选合适剂量PF干预海马神经元凋亡。依据MTT测定结果，分为空白组、模型组和20,40,80μmol·L-1 PF组干预海马神经元细胞，作用24 h后，加醋酸铅染毒，检测细胞色素C(cytochromeC,Cyt-C)含量、线粒体膜电位及细胞内Ca2+浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡情况，Western blotting测定海马神经元细胞中caspase-3、cleaved-caspase-3、caspase-8、cleaved-caspase-8、caspase-9、cleaved-caspase-9、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果 细胞免疫荧光染色鉴定结果显示分离培养的细胞为海马神经元细胞，且纯度较高。MTT测定结果显示醋酸铅最适造模浓度及时间为25μmol·L-1染毒24 h;PF剂量为20,40,80μmol·L-1可显著改善海马神经元细胞活性，呈剂量依赖性。与空白组相比，模型组Cyt-C含量、凋亡率、细胞内Ca2+浓度显著升高(P<0.01)，线粒体膜电位显著降低(P<0.01)。与模型组相比，40μmol·L-1 PF组和80μmol·L-1 PF组可降低Cyt-C含量、凋亡率、细胞内Ca2+浓度(P<0.05或P<0.01)，升高线粒体膜电位(P<0.01),20μmol·L-1PF组可显著升高线粒体膜电位(P<0.05)。此外，一定剂量的PF可下调cleaved-caspase-3、 cleaved-caspase-8、cleaved-caspase-9、Bax蛋白表达，上调Bcl-2蛋白表达。结论 PF可抑制醋酸铅诱导的海马神经元凋亡，可通过调控Bcl-2/Bax蛋白表达发挥神经保护作用。

• 单位
  杭州市红十字会医院