摘要
目的 建立人诱导多潜能干细胞来源心肌细胞(human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes,hiPSC-CM)回转失重细胞模型,探讨模拟失重对心肌细胞自噬的影响。方法 体外培养人诱导多潜能干细胞(hiPSC),采用化学诱导的方法定向分化成具有自主收缩的心肌细胞。将hiPSC-CM随机分为模拟失重72 h组和对照组,观察细胞形态的改变。利用透射电镜观察模拟失重对亚细胞结构的影响,采用Western blotting检测各组细胞LC3和Atg7的蛋白表达变化。结果 与对照组相比,模拟失重72 h组hiPSC-CM中自噬体和自噬溶酶体结构明显增多,自噬微管相关蛋白LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ蛋白表达比值显著升高(P<0.05),Atg7表达显著升高(P<0.05)。结论 hiPSC-CM在模拟失重条件下自噬水平发生上调,参与细胞程序性死亡。
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单位解放军总医院