p53基因对人肺癌细胞系耐药性的影响

作者：陶虹; 朱允中; 汪惠; 赖百塘; 张春彦; 湛秀萍; 王玥; 杨学惠; 岳文涛; 张洪涛

来源：中国肺癌杂志, 2008, 11(02): 157-164.

DOI：10.3779/j.issn.1009-3419.2008.02.001

• p53基因
• 耐药
• 细胞周期
• 凋亡

背景与目的肺癌细胞的耐药性是影响化疗疗效的重要因素之一,已有的研究表明p53基因异常与肿瘤细胞耐药性的产生密切相关。本研究的目的是探讨不同状态的p53基因对人肺癌细胞系耐药性的影响,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法采用质粒pEGFP,分别构建含正义、反义p53cDNA的真核细胞表达载体,测序法检测外源p53基因。用脂质体介导转染人肺癌细胞系801D,建立含不同p53基因状态的单克隆细胞系,分别为pEGFP-801D、pEGFP-sensep53-801D[含有正义p53,pEGFP-p53(RS)-801D]、pEGFP-antisensep53-801D[含有反义p53,pEGFP-p53(AS)-801D]。荧光显微镜观察细胞绿色荧光,PCR法检测外源基因,MTT法检测耐药性,流式细胞术检测细胞周期与凋亡。结果测序结果显示外源p53基因分别以正向、反向连接于载体,荧光显微镜下转染细胞可见绿色荧光,PCR法检测出外源p53基因和neo基因。pEGFP-p53(AS)-801D细胞系对顺铂(Cisplatin,DDP)的IC50为0.26±0.09μg/mL,显著低于母系(0.55±0.19μg/m...