干扰RNCR2表达通过负调控miR-130b保护高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤

作者：吴飞飞; 杨庆安; 卢朝秀; 郭鑫; 姜胜^*

来源：中华生物医学工程杂志, 2020, 26(05).

• RNCR2
• miR-130b
• 肾小球系膜细胞
• 氧化应激
• 炎症
• 凋亡

目的探讨RNCR2对高糖诱导的肾小球系膜细胞损伤的影响及作用机制。方法体外培养肾小球系膜细胞SV40-MES-13,分为对照组、高糖组、高糖+si-NC组、高糖+si-RNCR2组、高糖+miR-NC组、高糖+miR-130b组、高糖+si-RNCR2+anti-miR-NC组和高糖+si-RNCR2+anti-miR-130b组,RT-qPCR检测RNCR2、miR-130b、MCP-1和IL-6的mRNA表达水平,酶联免疫吸附法检测MDA和SOD水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹法检测Caspase3蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证RNCR2与miR-130b调控关系。结果与对照组比较,高糖组SV40-MES-13细胞中RNCR2水平(3.66±0.11比0.97±0.09)、MDA含量[(14.52±0.60)nmol/ml比(5.71±0.44)nmol/ml]、细胞凋亡率、Caspase3蛋白及MCP-1和IL-6的mRNA水平均升高(P<0.05),SOD水平[(14.84±0.43)U/ml比(39.59±1.19)U/ml]降低(P<0.05)。与高糖+si-NC组比较,高糖+si-RNCR2组SV40-MES-13细胞中MDA含量、细胞凋亡率、Caspase3蛋白及MCP-1和IL-6的mRNA水平均降低(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05)。RNCR2在SV40-MES-13细胞中负调控miR-130b表达。与高糖+miR-NC组比较,高糖+miR-130b组SV40-MES-13细胞中MDA含量、细胞凋亡率、Caspase3蛋白及MCP-1和IL-6的mRNA水平均降低(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05)。与高糖+si-RNCR2+anti-miR-NC组比较,高糖+si-RNCR2+anti-miR-130b组SV40-MES-13细胞中MDA含量、细胞凋亡率、Caspase3蛋白及MCP-1和IL-6的mRNA水平均升高(P<0.05),SOD水平降低(P<0.05)。结论干扰RNCR2表达可能通过负调控miR-130b降低高糖诱导的肾小球系膜细胞SV40-MES-13氧化应激、炎症反应和凋亡,保护细胞损伤。

• 单位
  长治医学院; 长治医学院附属和平医院