食品中单核细胞增生李斯特菌的重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

作者：何洁; 朱超; 黄珊珊; 吴巧维; 孙萍; 劳华均^*

来源：中国食品卫生杂志, 2021, 33(03): 274-278.

DOI：10.13590/j.cjfh.2021.03.006

• 单核细胞增生李斯特菌
• 重组酶聚合酶扩增技术(RPA)
• hlyA
• 检测

目的建立食品中单核细胞增生李斯特菌的重组酶聚合酶扩增(RPA)检测体系。方法针对单核细胞增生李斯特菌的特异性基因hlyA,筛选出一组特异性强且高效的引物,建立单核细胞增生李斯特菌的RPA检测体系,并进行特异性、灵敏度检测。结果建立的RPA方法在37℃恒温反应仅需30 min,能够特异地检测单核细胞增生李斯特菌,最低模板浓度可低至0.5 ng/μL。人工染菌试验显示,该RPA体系可以有效扩增出每2.5 g样品中人工染菌104 CFU样品中的单核细胞增生李斯特菌。结论 RPA等温扩增方法特异较强、灵敏度较高,具有操作简便、不需要昂贵仪器、常温进行扩增反应等优点,适用于现场检测以及在基层实验室推广应用。