酶法体外高效制备信号分子（pp）pGpp

作者：陈传玉; 谭樊杰; 殷平; 张德林^*

来源：华中农业大学学报, 2022, 41(04): 271-278.

DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2022.04.033

• (pp)pGpp
• 合成生物学
• 体外合成
• RelA
• GppA
• YvcI

针对目前信使分子（pp）pGpp提取和合成成本高、时间长、技术难的问题，以现有的体外酶合成（pp）pGpp的方法为基础，建立和优化了新的体外合成技术。结果显示，通过（pp）pGpp合成酶RelA、GppA和YvcI在25 mmol/L Tris-HCl(pH 9.0)、15 mmol/L MgCl2、100 mmol/L NaCl条件下于37℃反应30 min，经阴离子交换进一步纯化，即可获得高纯度（pp）pGpp分子。此方法与传统的细菌或植物体内直接提取、现有的体外酶法制备流程相比，具有操作简单、快速、成本低、环境友好等优势，能够满足下游生化分析和结构生物学实验需求，为微生物信号通路及开发新的抗菌药物研究提供物质基础。

• 单位
  生命科学技术学院; 华中农业大学