不同储存时间的少白细胞单采血小板中外泌体释放及内容物

作者：张进萍; 陈冰冰; 郑华晖; 杨华娟; 宋霖^*

来源：中国实验血液学杂志, 2019, 27(06): 1993-1997.

DOI：10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2019.06.046

• 少白细胞单采血小板
• 储存时间
• 外泌体
• 蛋白
• 核糖核酸

目的:探讨不同储存时间对少白细胞单采血小板(leukocyte-reduced apheresis platelet,LRA-Plt)中外泌体(exosome,EXO)释放及内容物的影响。方法:应用ExoQuick获得不同储存时间对LRA-Plt中的EXO,采用透射电镜术(transmission electron microscopy,TEM)、蛋白免疫印迹法、动态光散射(Dynamic Light Scattering,DLS)法分别进行形态、免疫标记、粒径分布检测。应用DLS检测不同储存时间LRA-Plt中EXO的粒径分布变化,通过Nanodrop?ND-2000检测不同储存时间LRA-Plt中EXO的蛋白和RNA含量变化。结果:成功获取类杯状、CD63/TSG101富集、Calnexin阴性、直径分布在30-200 nm的LRA-Plt来源EXO。储存早期(储存d 1、2),LRA-Plt来源EXO的粒径较小,分布多在30-40 nm;蛋白和RNA含量较低;2组间粒径分布、蛋白和RNA含量无显著差异(P> 0.05)。储存中晚期,LRA-Plt来源EXO的粒径较储存早期大,分布多在130-200 nm;蛋白和RNA含量较早期显著上升;与储存早期相比,储存中晚期LRA-Plt中EXO在粒径分布、蛋白和RNA含量上均出现显著上升(P <0.05)。结论:储存中晚期的LRA-Plt中EXO形态与储存早期存在差异,且粒径分布、蛋白和RNA含量显著高于储存早期。EXO携带的大量蛋白和RNA可能参与了血小板输注后多种功能作用的执行。

• 单位
  厦门大学