MACS法和EasySep法分选人外周血调节性T细胞的效果比较

作者：武星星; 孙强; 阳玉洁; 王钦; 魏玉惠; 王云甫^*

来源：湖北医药学院学报, 2020, 39(04): 334-419.

DOI：10.13819/j.issn.2096-708X.2020.04.005

• 调节性T细胞
• 免疫磁珠分选

目的:比较MACS法与EasySep法两种分选人外周血调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)效果的差异,探索一种更高效分选Tregs的方法。方法:采集健康成年人的外周血,用Ficoll密度梯度离心法分离出人外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC),将PBMC均分为两组:MACS法分选组和EasySep法分选组,分别选用基于分离柱的人CD4+CD25+调节性T细胞MACSTM分选试剂盒和EasySepTM人CD4+CD25highT细胞分选试剂盒两种分选方法分离得到Tregs,并对其数量、存活率、细胞形态和纯度等进行比较。结果:MACS法分选组的Tregs细胞数为:(2.19±0.21)×106个,EasySep法分选组的细胞数为:(1.73±0.12)×106个,明显低于MACS法分选组(t=4.551,P<0.05);MACS法分选组细胞存活率为:(94.37±4.15)%,EasySep法分选组细胞存活率为(91.98±1.23)%,明显低于MACS法分选组(t=3.073,P<0.05);MACS法分选组细胞培养后部分细胞形态不规则,为杆状或椭圆状,而EasySep法分选组细胞形态保持完好,无变形;MACS法分选组的CD4+CD25+Treg比例为:(96.52±1.42)%,EasySep法分选组为:(85.67±10.58)%,明显低于MACS法分选组(t=2.489,P<0.05);MACS法分选组CD4+CD25+CD127low/-Tregs的比例为:(67.85±1.11)%,EasySep法分选组为:(63.08±1.11)%,明显低于MACS法分选组(t=7.448,P<0.05)。结论:两种方法各有优势,但基于分离柱的MACS法得到的Tregs数量多,纯度高,且具有功能性的Tregs比例高,是一种更为高效的分选人外周血调节性T细胞的方法。

• 单位
  十堰市太和医院; 锦州医科大学; 孝感市中心医院; 神经内科; 湖北医药学院