高效阴离子色谱结合脉冲安培检测器分析单抗N糖谱的方法学联合验证

作者：王文波; 武刚; 于传飞; 张峰; 王兰^*

来源：中国新药杂志, 2020, 29(14): 1654-1659.

• 单克隆抗体
• N糖基化修饰
• 方法学验证
• 高效阴离子色谱

目的:对高效阴离子色谱结合脉冲安培检测器(high performance anion exchange chromatography with pulsed amperometric detection,HPAEC-PAD)方法检测单抗N糖谱进行多家实验室的联合验证。方法:依据ICHQ2R1指导原则和《中华人民共和国药典》2015年版通则9101,开展方法学验证。评价指标包括:特异性、线性、准确性、精密性、定量限、范围和耐用性。结果:验证数据表明,该方法具有良好的特异性、准确性、精密性和耐用性。在200～800μg蛋白范围内具有良好的线性,r2> 0. 96,且回收率在80%～120%范围内。精密性评价结果显示,该方法整体的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)<10%。该方法的定量限为0. 082%,可对在0. 082%～79. 082%比例范围内的单个色谱峰进行准确定量分析。同时多个条件下的耐用性评价结果表明该方法具有耐用性,峰面积百分比RSD <10%,保留时间RSD <6%。结论:组织开展了基于HPAEC-PAD的检测单抗N糖谱的方法学联合验证,为《中华人民共和国药典》标准提高提供方法学验证依据。

• 单位
  中国食品药品检定研究院