基于UPLC-Q-TOF-MS结合网络药理学与实验验证探讨四君子汤治疗阿尔茨海默病的作用机制

作者：蔡可珍; 郑琴^*; 朱徐东; 魏韶锋; 吴梦琪; 熊慧; 赵海婷

来源：中国中药杂志, 2023, 48(06): 1620-1631.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20221209.401

• 四君子汤
• 入血成分
• 网络药理学
• 阿尔茨海默病
• UPLC-Q-TOF-MS
• PI3K/Akt信号通路

采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)联用技术分析灌胃给药后四君子汤提取液在大鼠体内的入血成分，并结合网络药理学、分子对接和实验验证研究四君子汤治疗阿尔茨海默病的作用机制。根据一级质谱和二级质谱信息，结合文献和数据库数据，对四君子汤入血成分进行指认。基于这些成分结合PharmMapper、OMIM、DisGeNET、GeneCards和TTD数据库筛选四君子汤入血成分治疗阿尔茨海默病的潜在作用靶点，经网络药理学预测运用STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction, PPI)网络；通过DAVID数据库实现京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)信号通路和基因本体论(Gene Ontology, GO)功能富集分析；Cytoscape 3.9.0软件进行可视化分析，最后使用AutoDock Vina和PyMOL软件对相关入血成分与核心靶点进行分子对接。最后依据KEGG通路分析结果，选择PI3K/Akt信号通路进行动物实验验证。结果显示，大鼠灌胃给药后在血清样本中检测到17个入血成分，其中茯苓新酸B、甘草素、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、人参皂苷Rb1、甘草酸等化合物为四君子汤发挥治疗阿尔茨海默病药效的关键成分，HSP90AA1、PPARA、SRC、AR、ESR1等为四君子汤治疗阿尔茨海默病的主要靶点。分子对接显示核心成分与核心靶点结合性较好，推测四君子汤防治阿尔茨海默病可能涉及PI3K/Akt信号传导通路、癌症的途径、MAPK信号传导通路等。动物实验验证结果表明，尼氏染色显示四君子汤治疗后可明显改善阿尔茨海默病小鼠海马齿状回(dentate gyrus, DG)区神经元细胞损伤状况，明显增加神经元细胞数量，增加小鼠海马p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K的比值。综上，四君子汤显示出良好的抗阿尔茨海默病作用，其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路相关，为深入阐明四君子汤作用机制及其临床应用提供了参考。

• 单位
  创新药物与高效节能降耗制药设备国家重点实验室; 江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心; 江西省药品检验检测研究院; 江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室