携带红色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒载体的构建及其体外试验研究

作者：卢建溪; 阳莉; 钱师宇; 王强

来源：中国病理生理杂志, 2011, (10): 2045-2048.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2011.10.038

• 腺病毒载体
• 红色荧光蛋白质
• 基因重组 Adenovirus vector
• Red fluorescent protein
• Genetic recombination

目的:采用体外连接技术构建含红色荧光蛋白(RFP)报告基因的重组腺病毒载体,为基因治疗与基因疫苗研究提供重要工具。方法:将pTurboRFP-N上的含RFP基因片段,经酶切连接定向克隆至转移载体pShuttle上,构成重组质粒pShuttle-TurboRFP-N。用I-Ceu I/PI-Sce I双酶切重组质粒pShuttle-TurboRFP-N和骨架质粒pH5'040 pkGFP-Ⅱ,回收目的片段,连接,获得重组腺病毒载体AdH5'.040.CMV.RFP-N。将其线性化后,经脂质体介导转染至AD293细胞内包装出重组腺病毒颗粒。通过荧光显微镜观察其在AD293细胞内的包装效率和RFP表...

• 单位
  中山大学附属第三医院; 暨南大学