ANKIB1的克隆、原核表达和纯化

作者：谢云飞; 杨子善; 马振玲; 解博红; 刘世饶

来源：生物技术通报, 2013, (07): 189-194.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2013.07.033

• ANKIB1基因
• 克隆
• 表达
• 纯化 ANKIB1gene Cloning Expression Purification

含锚蛋白重复序列和IBR结构域蛋白1(ANKIB1)含有RING-IBR-RING结构域、ANK模体和泛素结合模体,可能具有E3泛素连接酶活性和特殊的催化机制,但其功能目前所知甚少。采用巢式PCR技术分段扩增了人ANKIB1基因的cDNA,并通过基因重组构建了全长ANKIB1基因的完整编码序列。将ANKIB1连接到原核表达载体pGEX-5X-3中,用于表达GST-ANKIB1融合蛋白。在含有RING型蛋白稳定剂ZnCl2的培养基中,转化pGEX-5X-ANKIB1的大肠杆菌BL21(DE3)经过0.1 mmol/L IPTG在15℃低温条件下诱导10 h,成功表达了分子量高达148.5 kD的...

• 单位
  新乡医学院