基于SIRT1/PGC-1α信号通路探讨“标本配穴”电针对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用

作者：陈佳; 陈贝; 梁凤霞; 吴松; 陈松^*; 韩永丽; 胡静; 陈子琴; 王昆秀; 张艳琳; 罗志辉; 顾骁磊; 周婷

来源：针刺研究, 2022, 47(09): 759-768.

DOI：10.13702/j.1000-0607.20210883

• “标本配穴”
• 电针
• 糖尿病肾病
• SIRT1/PGC-1α信号通路
• 氧化应激

目的:观察“标本配穴”电针通过调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)信号通路对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏线粒体氧化应激损伤的保护作用。方法:Wistar大鼠随机分为正常组10只、模型组12只和电针组11只。采用高糖高脂饮食喂养6周联合链脲佐菌素注射法建立DN大鼠模型。电针组予“足三里”“关元”“丰隆”“中脘”电针治疗，15 min/次，隔日1次，连续8周。检测并记录各组大鼠体质量、空腹血糖(FBG)、24小时尿蛋白定量(24-h UP);免疫比浊法检测血清糖化血红蛋白(HbA1c)水平；苦味酸法和脲酶法检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量；全自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量；黄嘌呤氧化法、二硫代二硝苯甲酸法、钼酸铵法检测肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)活性；硫代巴比妥钠法检测肾脏组织丙二醛(MDA)含量；苏木精-伊红(HE)染色、过碘酸希夫(PAS)染色、马松(Masson)染色观察肾脏组织病理学改变；透射电镜观察肾组织超微结构；荧光定量PCR法、Western blot法检测大鼠肾脏组织中SIRT1、PGC-1αmRNA和蛋白表达；免疫组织化学法检测肾脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达；免疫荧光染色法检测肾脏组织中胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)、胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)、纤维连接蛋白(FN)的表达。结果:与正常组比较，模型组大鼠FBG、24-h UP显著升高(P<0.01),体质量显著降低(P<0.01);血清中HbA1c、BUN、Scr、TG、TC、LDL-C含量显著升高(P<0.01),HDL-C含量显著降低(P<0.01);肾脏组织中SOD、GSH、CAT活性显著降低(P<0.01,P<0.05),MDA含量显著升高(P<0.01);肾脏组织中SIRT1、PGC-1αmRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),α-SMA、ColⅠ、ColⅣ、FN蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较，电针组FBG、24-h UP显著降低(P<0.05,P<0.01),体质量显著升高(P<0.05);血清中HbA1c、BUN、Scr、TG、TC、LDL-C含量显著降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C含量显著升高(P<0.05);肾脏组织中SOD、GSH、CAT活性显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.01);肾脏组织中SIRT1、PGC-1αmRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),α-SMA、ColⅠ、ColⅣ、FN蛋白表达显著降低(P<0.01)。模型组HE染色显示肾组织系膜扩张、肾小球肥大、系膜基质聚集，PAS染色显示肾小球细胞外基质沉积，Masson染色显示肾小球纤维化增强、间质间隙扩大，电镜显示肾组织出现足突融合、基底膜增厚、细胞器损伤；电针组上述损伤均有不同程度减轻。结论:“标本配穴”电针可能通过激活SIRT1/PGC-1α信号通路减轻肾脏氧化应激和线粒体功能障碍，改善DN大鼠肾组织纤维化。

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 湖北中医药大学