基因分析联合蛋白质免疫印迹法鉴定极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症ACADVL基因新发突变位点的致病性

作者：王彦云; 孙云; 蒋涛^*

来源：中华诊断学电子杂志, 2021, 9(03): 176-180.

• 极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症
• ACADVL基因
• 印迹法,蛋白质
• 突变
• 串联质谱法

目的探讨基因分析联合蛋白质印迹(Western blotting)法在极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(VLCADD)ACADVL基因新发突变位点致病性鉴定中的临床应用。方法收集2017年6月1日至2020年10月31日南京市新生儿疾病筛查中心筛查的290 738例新生儿遗传代谢病筛查样本中,通过串联质谱法检测疑似VLCADD的4例患儿及父母,采集外周血进行基因分析,并用Western blotting检测外周血中极长链酰基辅酶A脱氢酶(VLCAD,也称为ACADVL)蛋白表达量变化。结果 4例患儿通过基因分析被诊断为VLCADD,共检测到8个突变位点[2个疑似致病变异(c.664 G>C、c.342+1 G>A),5个临床意义不明(c.694 G>A、c.1699 C>T、c.1030 A>G、c.1247 C>T、c.833835 del),1个位点为首次报道(c.1077+6 T>A)]。4个家系共计12个外周血样本通过Western blotting均能检测到ACADVL蛋白的表达,但患儿的目标蛋白表达量均明显低于其父母。家系1的外周血样本保存时间较另外3个家系长,ACADVL蛋白在家系1的父母检测中明显低于另外3个家系;且与外周血保存时间基本一致的非VLCADD家系5比较,家系5内参ACTIN蛋白表达量下降更为明显。结论疑似VLCADD患儿的ACADVL基因检测的位点为临床意义不明时,建议使用新鲜的外周血样本,通过Western blotting完善ACADVL蛋白检测,该结果与基因检测结果可互为补充。

• 单位
  南京市妇幼保健院; 南京医科大学