ADV VP2主要抗原表位基因核酸疫苗与IL-12、IFN-γ细胞因子佐剂质粒的构建及鉴定

作者：柏玲; 朱言柱; 胡博; 朱翔宇; 张海玲; 廉士珍; 张蕾^*

来源：特产研究, 2020, 42(02): 1-14.

DOI：10.16720/j.cnki.tcyj.2020.02.001

• 水貂阿留申病毒
• VP2
• 抗原抗体复合物
• IL-12
• IFN-γ
• 核酸疫苗

为研制安全有效的水貂阿留申病毒(ADV)VP2核酸疫苗,本研究构建了不含有形成抗原抗体复合物表位的VP2核酸疫苗以及IL-12、IFN-γ细胞因子真核表达质粒,在体外细胞水平鉴定上述目的基因的表达情况。首先,以各克隆质粒为模板,PCR扩增获得ADV的VP2主要抗原表位M、鼠IL-12和IFN-γ的基因片段,连接至pVAX1载体,经酶切及测序鉴定后,确定构建正确;其次,将真核表达质粒转染入293T细胞,通过间接免疫荧光及Western Blot分析表达情况。结果显示:pVAX1-M可正常表达,并且目的蛋白可与ADV阳性血清结合,具有良好的反应原性。含细胞因子的真核表达质粒pVAX1-IL及pVAX1-IF转染293T细胞后,通过间接免疫荧光、Western Blot及ELISA分析证明,目的蛋白可在体外正常表达,且具有生物学活性。本研究可为水貂阿留申病核酸疫苗深入研究奠定基础。

• 单位
  中国农业科学院特产研究所