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摘要
目的 探讨内质网应激在胎盘组织中是否通过促炎作用对妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)的发病产生影响。方法 选取2016年1月至12月于华中科技大学同济医学院附属同济医院产科定期产前检查并分娩的40例孕妇,其中20例确诊为GDM(GDM组),其余20例为与GDM组孕妇年龄、孕周相匹配的正常孕妇对照组。收集2组孕妇胎盘组织,透射电镜下观察胎盘滋养细胞内质网超微结构,并采用蛋白质印迹法检测胎盘组织中内质网应激标志蛋白—葡萄糖调节蛋白-78(glucose-regulated protein-78, GRP-78)及C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)的表达情况。收集5例正常孕妇胎盘组织进行外植体培养,其中给予白细胞介素(interleukin, IL)-1β(5 ng/ml)培养胎盘组织20 h,称为IL-1β模型组；胎盘组织给予IL-1β(5 ng/ml)培养18 h后再加入内质网应激激动剂—毒胡萝卜素(thapsigargin, TG)(30 μmol/L)培养2 h,称为IL-1β+TG干预组；未给予任何刺激的胎盘组织为空白对照组。采用蛋白质印迹法检测各组胎盘组织外植体GRP-78、CHOP、葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4, GLUT4)的表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测促炎细胞因子—IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)的mRNA表达情况。采用单因素方差分析、t检验和LSD检验等进行统计学分析。结果 (1)透射电镜下可见GDM组滋养细胞内质网池数量增多、体积增大,内质网扩张明显并出现大小不等的片段和大小泡；对照组胎盘组织滋养细胞内质网无明显肿胀。(2)GDM组胎盘组织中GRP-78、CHOP蛋白相对表达量分别为0.90±0.17和0.85±0.13,均高于对照组(0.48±0.08和0.46±0.12),t值分别为2.24和2.10,P值均<0.05。(3)IL-1β模型组外植体培养胎盘组织中GRP-78、CHOP蛋白相对表达量均明显高于空白对照组(0.87±0.18与0.36±0.07,1.14±0.09与0.78±0.06),GLUT4蛋白相对表达量明显低于空白对照组(1.00±0.14与2.21±0.49),IL-6、TNF-α mRNA相对表达量均明显高于空白对照组(0.89±0.23与0.30±0.06,0.62±0.16与0.17±0.09),t值分别为2.67、3.20、2.40、2.31和2.29,P值均<0.05；与IL-1β模型组比较,IL-1β＋TG干预组外植体培养胎盘组织中GRP-78、CHOP蛋白相对表达量明显增加(2.02±0.32与0.87±0.18、2.18±0.31与1.14±0.09),GLUT4蛋白相对表达量明显降低(0.39±0.19与1.00±0.14),IL-6、TNF-α mRNA相对表达量均明显增加(1.67±0.25与0.89±0.23,1.42±0.27与0.62±0.16),t值分别为3.11、3.16、2.66、2.26和2.51,P值均<0.05。结论 内质网应激可能参与部分GDM患者胎盘组织促炎细胞因子释放,进而参与GDM的发生及发展。
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