自组装双亲短肽氨基酸组成及连接肽对其融合酶表达量的影响

作者：赵伟欣; 刘松; 刘立明; 陈坚; 堵国成

来源：食品与发酵工业, 2017, 43(12): 1-6.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.014923

• 自组装双亲短肽
• 融合蛋白
• 连接肽
• 氨基酸极性
• 表达量
• 碱性果胶酶

自组装双亲短肽(self-assembling amphipathic peptides,SAPs)是一类亲疏水氨基酸按一定规律分布,具有自聚合效应的氨基酸短肽,融合在酶蛋白N端时,具有促进表达和稳定化的功能。以自组装双亲短肽S1(AEAEAKAKAEAEAKAK)为出发序列,与来源于Bacillus sp.WSHB04-02的碱性果胶酶(alkaline polygalacturonate lyase,PGL)组成的融合酶为模式蛋白,考察SAPs的氨基酸组成及SAPs融合蛋白内部连接肽(linker peptide)对PGL-SAP融合酶的表达量的影响。结果显示,含有较弱疏水性的甘氨酸和丙氨酸残基的PGL-S1突变体可使融合酶正常表达,其中,含有组氨酸的PGL-S1v1具有相对最高的胞外酶活,较野生型提高了9倍,较PGL-S1提高了1.5倍。连接肽方面,与刚性连接肽相比,含有柔性连接肽的融合酶具有更高的胞外酶活,含有(GGGGS)3的PGL-F-S1融合酶胞外酶活是野生型的14倍。上述结果表明,SAPs的氨基酸组成及融合蛋白之间的连接肽对PGL融合酶的表达具有重要影响。

• 单位
  生物工程学院; 食品科学与技术国家重点实验室; 江南大学; 工业生物技术教育部重点实验室