流体切应力对人脐带血间充质干细胞形态、黏附及增生能力的影响

作者：段素娟; 崔雯雯; 柳星; 黄国富^*

来源：中华实验眼科杂志, 2019, (11): 870-875.

• 流体切应力
• 人脐带血间充质干细胞
• 角膜内皮细胞
• 细胞间黏附因子-1

目的 探讨流体切应力对人脐带血间充质干细胞(hUC-MSCs)形态、黏附及增生能力的影响。方法 将体外培养的hUC-MSCs置于流动小室系统中,分别施加不同强度(1、2、3、4 dye/cm2)的流体切应力作用2 h、6 h,以未施加切应力的hUC-MSCs为静态对照组,倒置相差显微镜下比较各组细胞的形态改变；免疫荧光染色观察各组细胞骨架变化；real-time PCR法检测细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、Ki67 mRNA表达水平的差异。结果 与静态杂乱无章的细胞相比,流体切应力作用后hUC-MSCs顺着流体方向排列。免疫荧光结果显示,流体作用后细胞骨架蛋白F-actin肌丝延长,与2 dye/cm2切应力作用2 h组相比,2 dye/cm2切应力作用6 h组细胞骨架被进一步拉长,部分细胞骨架呈松散状态。Real-time PCR结果显示,静态对照组与不同梯度流体切应力作用组ICAM-1、Ki67 mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(F＝17.141,P＝0.000；F＝11.336,P＝0.001),其中1、2、3、4 dye/cm2切应力流体作用后细胞表面ICAM-1 mRNA的相对表达量分别为2.74±0.32、9.77±1.19、6.70±0.92和5.69±0.72,较静态对照组的1.00±0.28明显上调,差异均有统计学意义(均P<0.05)；3 dye/cm2、4 dye/cm2切应力组Ki67 mRNA的相对表达量分别为0.39±0.09和0.04±0.02,较静态对照组的1.00±0.24明显减低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 流体切应力作用后,hUC-MSCs顺流体方向排列,流体切应力作用2 h可促进hUC-MSCs黏附,随着流体切应力作用强度的增加,细胞增生受到抑制。

• 单位
  南昌市第一医院; 南昌大学