SD大鼠肝枯否细胞分离培养的改良方法与鉴定

作者：李敏利; 许小兵; 杨妙芳; 朱人敏; 吴晓尉; 张晓华

来源：医学研究生学报, 2012, (07): 702-706.

• 枯否细胞
• 细胞培养
• 梯度离心 Kupffer cell
• Cell culture
• Gradient centrifugation

目的枯否细胞(Kupffer cells,KC)是肝内巨噬细胞群,活化的KC参与多种生物、病理学反应过程。然而,KC分离、培养技术进展缓慢。为研究KC致炎、抗炎活化机制,旨在建立经济、简便、有效、稳定分离培养SD大鼠肝KC的方法。方法选用健康雄性SD大鼠,采用0.05%IV型胶原酶灌注肝,经25%和50%percoll密度梯度离心,提取肝KC。荧光显微镜下观察细胞自发荧光情况,锥虫蓝拒染实验鉴定细胞活力,倒置显微镜下观察KC培养过程中细胞形态变化,吞噬墨水、latex珠实验以及免疫细胞化学染色法鉴定细胞纯度。结果大鼠肝KC得率为(3.22±0.31)×107(n=24),细胞活力为(92.35±0.13)%,细胞纯度均在(94.62±0.24)%。结论该方法简单、可行,为进一步研究KC功能和作用机制奠定基础。

• 单位
  中国人民解放军东部战区总医院