基于蛋白A-琼脂糖凝胶黄曲霉毒素B1免疫亲和柱的制备

作者：龚燕; 杨婷婷; 莫晓嵩; 张海涛; 黄伟; 陆廷瑾; 张东升; 汪海峰

来源：食品科学, 2015, 36(10): 216-220.

• 黄曲霉毒素B1
• 蛋白A-琼脂糖凝胶
• 定向偶联
• 免疫亲和柱

将初步纯化的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体,定向偶联于蛋白A-琼脂糖凝胶,制备成免疫亲和层析柱。结果显示,辛酸-饱和硫酸铵纯化后的单抗质量浓度为17.5 mg/m L,纯度为45.1%,抗体亚型为Ig G1。取纯化后抗体48μL与1 m L蛋白A凝胶偶联,偶联率达98.1%,高效液相色谱测定其平均相对柱容量为105 ng/0.125 m L凝胶、柱空白为0,不同样品(玉米粉、面粉、花生油、酱油、醋等)平均加标回收率在80%以上。该亲和柱在28℃保存12个月后,相对柱容量仍可达72 ng/0.125 m L凝胶。该法制备的亲和柱相对柱容量大,稳定性好,可用于样品中黄曲霉毒素B1分离净化的要求。

• 单位
  南京财经大学; 江苏省苏微微生物研究有限公司