胃肠道肿瘤靶向抗癌胚抗原单链抗体与T细胞表面受体基因的融合分子构建

作者：徐立; 徐宏勇; 樊代明

来源：中华消化杂志, 2004, (02): 11-13.

• 单链抗体
• CD3分子
• 癌胚抗原

目的　将胃肠道癌胚抗原 (CEA)特异性单链抗体基因与人T细胞CD3ζ胞内区、跨膜区基因克隆入真核表达载体 ,表达相应的融合分子 ,以期制备消化道肿瘤靶向性杀伤T细胞。方法　应用PCR法扩增抗CEA特异性单链抗体 (scFv)基因 ;用RT PCR法从正常人外周血T细胞扩增出CD3ζ胞内区、跨膜区基因 ;将单链抗体插入CD3ζ基因序列的上游 ,构建重组真核表达载体scFv CD3ζ pcDNA3.0并测序。结果　抗CEAscFvcDNA片段为 810bp ,与已知的序列相符 ;CD3ζ胞内区、跨膜区的cD NA片段为 4 38bp ,与基因库公布的序列一致。重组的表达载体经酶切琼脂糖电泳及测序加以证实。 结论　成功制备了具有抗肿瘤相关抗原CEA靶向性及CD3ζ胞内区、跨膜区信号转导功能的重组分子 ,为制备消化道肿瘤靶向性嵌合锚定T细胞奠定了实验基础

• 单位
  西京医院; 第四军医大学