摘要
目的检测微小RNA(miRNA,miR)-194在肝癌组织以及肝癌细胞株中的表达,探讨miR-194对肝癌细胞生物行为学的影响。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测miR-194在20例肝癌组织和20例癌旁组织以及肝癌细胞株HepG2和正常肝细胞株L02中的表达,建立miR-194过表达或低表达肝癌细胞株,采用细胞增殖实验、划痕实验、蛋白免疫印迹技术检测癌细胞的增殖、迁移能力改变及其相关机制。结果 miR-194在肝癌组织中的相对表达量著高于癌旁组织,差异有统计学意义(0.364±0.040比0.198±0.028,t=3.176,P=0.003);在肝癌细胞株HepG2中的相对表达量也显著高于正常肝细胞株,差异有统计学意义(0.517±0.069比0.181±0.025,t=4.557,P=0.010);在肝癌细胞株HepG2中,高表达miR-194组细胞的增殖能力(1.857±0.170比1.019±0.019,t=7.065,P=0.000)和迁移能力(0.483±0.084比0.927±0.030,t=5.181,P=0.008)较对照组肝癌细胞显著增强,差异有统计学意义,而低表达组细胞的增殖能力(0.529±0.095比1.019±0.019)较对照组肝癌细胞显著降低(t=5.422,P=0.006)。检测Wnt/β-连环蛋白(p-catenin)的表达改变,miR-194过表达细胞的Wnt蛋白的表达显著高于对照组(0.589±0.194比0.302±0.013,t=3.035,P=0.039);且β-catenin蛋白的表达亦显著高于对照组(0.941±0.101比0.220±0.115,t=9.434,P=0.000),差异均有统计学意义,而miR-194低表达细胞的Wnt蛋白(0.310±0.028比0.260±0.026,t=1.308,P=0.261)和β-catenin蛋白(0.179±0.028比0.080±0.034,t=2.242,P=0.088)较对照组表达差异无统计学意义。结论 miR-194在肝癌组织中高表达,其可能与肝癌细胞的增殖和侵袭能力增加有关,miR-194的上述作用可能是通过上调Wnt/β-catenin信号通路实现。
-
单位解放军武汉总医院; 湖北省妇幼保健院