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摘要
目的建立一种体外分离、培养骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的方法,研究BMMSCs传代扩增培养与干细胞干性的维持关系。方法采用全骨髓细胞贴壁培养法对大鼠BMMSCs进行分离、培养、传代。采用倒置显微镜观察各代细胞的形态,通过流式细胞术(FACS)观察各代BMMSCs干细胞干性,通过免疫荧光检测各代BMMSCS在肝硬化模型的表达。结果大鼠BMMSCs呈均一的成纤维细胞样。连续传代干细胞始终保持着旺盛的生长力及扩增力。FASC结果表明,CD29、CD44、CD90的表达率随着传代的进行逐渐增高,P5-P6时表达最高,之后其表达率逐渐下降,免疫荧光检测发现P5-P6代干细胞在大鼠肝硬化模型中表达最强。结论随着传代BMMSCs的干性逐渐增强,传代至P5-P6时干细胞干性最强,随着传代的继续其干性逐渐下降。
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单位哈尔滨医科大学附属第二医院; 鹤岗矿业集团有限责任公司
