摘要

目的观察NKG2D/RAE-1通路在介导自然杀伤(NK)细胞、CD8+T细胞(两种细胞简称NK/T细胞)杀伤垂体瘤细胞中的作用,从细胞学水平探讨垂体瘤的免疫逃逸机制。方法以小鼠垂体瘤细胞系At T20为研究对象,采用免疫荧光标记法检测NKG2D配体RAE-1在垂体瘤细胞的表达水平及定位分布情况。采用NK/T细胞分选试剂盒分离NK/T细胞,将NK/T细胞放入Transwell小室的上室,靶细胞At T20置入Transwell小室的下室,随机分为对照组、实验组。对照组在常规条件下共培养0、4、8、24 h,实验组在培养液中加入阻断RAE-1的抗体(AntiRAE1抗体)共培养0、4、8、24 h;采用MTT法检测两组各时间点细胞增殖抑制率。结果 RAE-1在At T20细胞膜明显表达,在细胞质内亦有弱表达。在At T20细胞中RAE-1蛋白阳性表达率为100%,其中强表达率为30%、中表达率为60%、弱表达率为10%,无阴性表达。对照组培养4、8、24 h时细胞增殖抑制率明显高于0 h时(P均<0.05);实验组培养0、4、8、24 h时增殖抑制率逐渐升高(P均<0.05),培养8、24 h时增殖抑制率均明显高于同时间点对照组(P均<0.05)。结论 NK/T细胞通过NKG2D/RAE-1通路杀灭垂体瘤细胞,RAE-1可负反馈作用于NK/T细胞,从而抑制免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。NKG2D/RAE-1通路可能作为垂体瘤的免疫治疗靶点。