平滑肌细胞特异表达Cre重组酶转基因小鼠的建立

作者：杨蕾蕾; 吴壮; 程萱; 徐军; 杨晓

来源：军事医学科学院院刊, 2005, (03): 219-222.

• Cre重组酶
• 小鼠,转基因
• α-平滑肌肌动蛋白

目的:建立平滑肌细胞特异表达Cre重组酶的转基因小鼠。方法:用分子克隆的方法构建含有α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)启动子、Cre重组酶基因和polyA的转基因载体α-SMA-Cre。以显微注射的方法将5.3kb的转基因片段引入小鼠基因组。通过PCR和LacZ染色以检测Cre重组酶在体内介导重组的功能。结果:共注射282枚受精卵,移植至10只假孕母小鼠的输卵管中发育,获得子代小鼠19只,经PCR鉴定有4只小鼠在基因组上整合有Cre基因,整合率为21%。将该小鼠与基因组上携带LoxP位点的Smad4条件基因打靶小鼠交配,通过PCR在所有含有平滑肌细胞的组织基因组DNA中检测到重组后的234bp特异条带。与“报告”小鼠—ROSA26交配,LacZ染色后小肠壁平滑肌细胞中特异地检测到Cre重组酶活性。结论:成功构建了平滑肌细胞特异表达Cre重组酶的转基因小鼠,该小鼠在平滑肌细胞中特异表达Cre重组酶,并能在体内成功地介导LoxP位点间的重组。

• 单位
  军事医学科学院; 广州医学院第一附属医院广州呼吸疾病研究所