羊口疮病毒ORF128锚蛋白对HEK293T细胞NF-κB信号通路的调节作用及机制

作者：安雪珂; 贾怀杰; 冯园; 陈国华; 何小兵; 景志忠^*; 王晓霞^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2019, 35(03): 243-249.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008759

• 羊口疮病毒(ORFV)
• 锚蛋白
• 核因子κB(NF-κB)
• 羊口疮病毒蛋白128(ORF128)

目的研究羊口疮病毒(ORFV)感染HEK293T宿主细胞后,其编码的锚蛋白ORF128蛋白对宿主核因子κB(NF-κB)信号通路的影响及其机制。方法将来自ORFV/QH02/2010株的ORF128 DNA序列分别构建至真核表达载体pCMV-tag2B和pEGFP-N1;在病毒感染细胞期间,利用反转录PCR检测ORF128 mRNA水平、激光共聚焦显微镜检测ORF128蛋白的亚细胞定位;利用双荧光素酶报告基因检测系统分析ORF128对NF-κB信号通路的调节作用, Western blot法检测NF-κBp65的核移位以及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的蛋白磷酸化水平。结果 ORF128蛋白在病毒感染早期表达且定位于宿主细胞核, ORF128蛋白可抑制NF-κB转录因子报告载体荧光素酶活性; ORF128的表达抑制NF-κBp65的核移位和磷酸化的IκBα(p-IκBα)的降解。结论 ORF128蛋白通过抑制p-IκBα蛋白的降解过程,阻止NF-κBp65蛋白核移位,进而抑制宿主NF-κB信号通路的活化。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 公共卫生学院; 兰州大学; 湘潭市中心医院; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所