抗鸭坦布苏病毒非结构蛋白1(NS1)单克隆抗体的制备

作者：顾香雪; 周祺; 曹昳; 夏宇航; 张冲; 王桂军^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2021, 37(05): 455-459.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009198

• 鸭坦布苏病毒(DTMUV)
• 非结构蛋白1(NS1)
• 单克隆抗体(mAb)

目的应用制备纯化的鸭坦布苏病毒(DTMUV)非结构蛋白1(NS1),制备其单克隆抗体(mAb)并鉴定抗体的特异性。方法将纯化的NS1蛋白免疫BALB/c小鼠,聚乙二醇(PEG)处理小鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合,经ELISA筛选和亚克隆得2株NS1单克隆抗体细胞株,命名为NS1B、NS1E。利用ELISA测定NS1 mAb效价,Western blot法和间接免疫荧光法(IFA)鉴定NS1 mAb特异性,试剂盒测定NS1mAb亚类。最后,用NS1 mAb对感染DTMUV后6、12、24、36 h的BHK-21细胞进行IFA检测,观察NS1蛋白的表达。结果 NS1 mAb的亚型为IgG1,效价达到1∶1.28×104;表明制备的NS1 mAb能识别天然NS1蛋白;DTMUV感染BHK-21细胞12 h后NS1蛋白开始表达。结论获得2株具有反应性、特异性且效价高的NS1 mAb,可用于DTMUV感染检测。

• 单位
  动物科技学院; 安徽农业大学