摘要
对6份缺铁敏感突变材料FMY003、FMY004、FMY008、FMY009、FMY018、FMY019及其野生型‘京农6号’的再生和AtbHLH39-GUS基因瞬时表达效率进行比较分析,旨在筛选出再生能力强和转化效率高的突变体获得基因功能转化验证的适宜条件。对不同缺铁敏感突变体的胚尖和胚轴外植体的再生能力、适宜的激素配比和浓度、ATBHLH39-GUS基因瞬时表达效率、适宜潮霉素筛选浓度等条件进行比较分析,结果发现FMY018、FMY009胚尖再生能力强,胚尖再生芽率为80.3%和97.78%,瞬时表达效率为69.23%、61.82%。综合再生率和再生芽数,胚尖外植体再生的适宜激素配比是0.2 mg/L BAP+0.2 mg/L IBA,适宜的潮霉素筛选浓度均为3.00 mg/L。FMY003愈伤组织瞬时表达效率最高,为90.91%。TDZ诱导21 d时愈伤组织瞬时表达效率最高为93.75%,愈伤组织的适宜潮霉素筛选浓度为0.50 mg/L。本研究针对小豆缺铁敏感突变体的小豆胚尖、胚轴再生及遗传转化条件进行,为小豆铁吸收代谢基因功能转化验证提供技术支撑,为小豆铁吸收、运输和积累的调控机理解析提供基础,对改善小豆营养品质,提高产量和品质育种具有理论和实际应用价值。
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