米贝地尔对大鼠侧脑室下区神经干细胞体外增殖的影响

作者：张熙; 尉春艳; 古茹; 周乐

来源：解放军医学院学报, 2015, 36(08): 845-849.

• 神经干细胞
• 米贝地尔
• 细胞增殖
• 细胞周期

目的探讨体外条件下T型钙通道阻滞剂米贝地尔对神经干细胞增殖的影响,间接阐明T型钙通道在神经干细胞增殖中的作用。方法构建成年大鼠脑损伤模型,分离侧脑室壁的脑室下层(subventricular zone,SVZ)细胞及新生大乳鼠SVZ细胞,以神经干细胞悬浮培养方法培养得到的细胞,观察细胞扩增及生长形态,并行Nestin染色;对培养的细胞传代培养及诱导分化,并对分化的细胞行NSE、GFAP免疫荧光染色。在神经干细胞培养基中加入米贝地尔,通过计数神经干细胞球,噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法分析米贝地尔对神经干细胞增殖的影响,计算半抑制浓度,在培养基中加入半抑制浓度的米贝地尔,将细胞分为实验组和对照组,Western blot法检测细胞周期蛋白(Cylin A)的表达。结果米贝地尔能够明显抑制神经干细胞球的形成,MTT法显示加入米贝地尔的浓度>5μmol/L时可显著抑制细胞增殖,5μmol/L组、10μmol/L组和20μmol/L组的OD值与对照组差异有统计学意义。米贝地尔对神经干细胞的半抑制浓度为8.93μmol/L。Western blot法提示加入半抑制浓度的米贝地尔后,Cyclin A蛋白的表达显著降低。结论米贝地尔能够抑制神经干细胞的增殖,其机制可能与抑制细胞周期相关。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院