miR-21-5p过表达对高氧性急性肺损伤大鼠AECⅡ早期凋亡的影响

作者：张伟; 徐乐; 陈淼^*; 梅鸿; 李康; 覃松; 刘国跃

来源：中华危重病急救医学, 2019, (08).

• 微小RNA-21-5p
• 高氧性急性肺损伤
• 肺泡上皮细胞,Ⅱ型
• 凋亡

目的 探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)过表达对高氧性急性肺损伤(HALI)大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)早期凋亡的影响。方法 按随机数字表法将SD大鼠分为对照组(CON组)、高氧组(H组)、过表达组(OE组)及空载体组(EV组)4组,每组20只。以吸入90%以上高浓度氧制备HALI动物模型；CON组则吸入空气。OE组及EV组分别经气管导管往肺内滴入miR-21-5p腺相关病毒-?6(AAV-6)过表达载体或空载体,饲养3周后制备HALI模型。各组于制模0、24、48、60 h分别取5只动物,检测肺损伤相关指标,如氧合指数(OI)、呼吸指数(RI)、肺湿/干重比值(W/D)、肺组织病理评分；同时采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测AECⅡ中miR-21-5p表达,用流式细胞仪检测AECⅡ早期凋亡率。结果 ①肺损伤相关指标：H组OI随时间延长逐渐降低,RI、肺W/D比值及病理评分均随时间延长逐渐增高,24 h即与CON组差异有统计学意义〔OI(mmHg,1 mmHg＝0.133 kPa)：336.04±5.79比400.22±19.70,RI：0.20±0.02比0.10±0.06,肺W/D比值：5.04±0.09比4.85±0.09,肺组织病理评分(分)：0.13±0.01比0.07±0.01,均P<0.05〕,表明持续吸入高浓度氧可成功建立HALI模型。② miR-21-5p表达：H组、OE组及EV组AECⅡ细胞中miR-21-5p表达均随时间延长逐渐增高,且24、48、60 h时miR-21-5p表达均显著高于CON组。OE组0、24、48、60 h时miR-21-5p表达较H组进一步增高(2-ΔΔCt：3.75±0.11比0.98±0.14,3.98±0.12比1.18±0.13,4.28±0.18比1.49±0.06,4.66±0.12比1.80±0.12,均P<0.05)。③ AECⅡ早期凋亡率：H组、OE组及EV组AECⅡ细胞早期凋亡率均随时间延长逐渐升高,且24、48、60 h时细胞早期凋亡率均显著高于CON组。而OE组24、48、60 h时AECⅡ早期凋亡率较H组显著降低〔(1.22±0.63)%比(2.84±0.59)%,(5.76±0.18)%比(13.10±2.01)%,(29.48±0.48)%比(49.04±1.36)%,均P<0.05〕。④ EV组各时间点miR-21-5p表达和AECⅡ早期凋亡率与H组比较差异均无统计学意义。结论 miR-21-5p过表达可抑制HALI大鼠AECⅡ早期凋亡。

• 单位
  遵义医学院附属医院; 青岛大学附属医院