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摘要
目的:观察氯化钴(CoCl2)模拟缺氧环境下肝癌细胞生物钟基因表达的变化。方法:以不同浓度(0,50,100,200μmol/L)的CoCl2处理肝癌细胞系Huh7细胞24 h后,用Western blot检测细胞中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的蛋白表达,real-time PCR检测细胞中生物钟基因CLOCK、BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、CKIε的mRNA表达。结果:Western blot结果显示,未处理Huh7细胞(0μmol/L CoCl2)无HIF-1α表达,而各浓度的CoCl2处理后,Huh7细胞出现明显的HIF-1α的蛋白表达,且表达水平随CoCl2浓度增加而升高。real-time PCR结果显示,CoCl2处理后的Huh7细胞中BMAL1、Per1、Cry2的mRNA水平明显上调,而CLOCK、Cry1、Per2、Per3、CKIε的mRNA水平明显下调,且均呈CoCl2浓度依赖性(均P<0.05)。结论:缺氧微环境可能是引起肝癌细胞生物钟基因表达异常的原因之一。
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